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细胞冻存液氮罐是一种低温容器,整个容器的内外胆之间是真空层,可以维持细胞、疫苗、精液、组织等生物,存放在液氮罐内可以长时间维持活性,但是冻细胞的时候应该注意哪些问题呢?首先我们需要知道冻存细胞的时候,需要包括准备、取材、培养和冻存复苏,为了保存细胞,需要注意操作细节。
液氮罐内冻存生物样品的注意事项:
1.当我们使用的时候,不能使用高压灭菌,因为它本身带有灭菌作用,如果再次高压灭菌会破坏分子结构,会降低冷冻保护效果。操作的过程中尽量带上手套,防止对人体造成危害;
2.我们冻存细胞的时候温度在0℃到-60℃的时候,不能时间过长,不然会影响细胞的活性;
3.多余冻存液可以4度低温保存;
4.冻存细胞的过程中需要定期检查液氮剩余量,防止出现液氮消耗完的现象。
实验室和院有时候需要储存细胞,将其冷冻起来,延长细胞的存活时间,要达到此效果,需要借助细胞冻存液氮罐和液氮来保持恒温,冻存细胞的步骤会影响到细胞复苏时的活力,所以在使用液氮罐储存细胞时应小心并按步骤操作,那么细胞如何储存在细胞冻存液氮罐呢?以下内容仅供参考。
1.预先配制冻存液;
2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);
3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀;
4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期;
5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,在液氮里可以放置更长时间。
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